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無縫克隆的10 μl反應(yīng)體系中,2-3 個組裝片段總加入量建議在0.03-0.2 pmol,4-6 個組裝片段總加入量建議在0.2-0.5 pmol。

計算線性化片段(包括載體和插入片段)的使用量,推薦以下計算公式:

線性化片段用量(ng)=皮摩爾數(shù)(pmols) × 堿基對數(shù)(bp)× 0.65 kDa

注:最優(yōu)反應(yīng)體系通常含有載體50-100 ng,各插入片段的摩爾數(shù)是載體的2-3倍。

任意輸入兩個參數(shù):線性化片段的用量、pmols數(shù)、片段堿基對數(shù),計算第三個參數(shù)結(jié)果。

ng

(線性化片段)

=
pmols
bp

(堿基對數(shù))

0.65kDa
計算結(jié)果 線性化片段質(zhì)量 pmols 堿基對數(shù)
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